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Do Gene à Proteína: Uma Abordagem Prática
Do Gene à Proteína: Uma Abordagem Prática

Do Gene à Proteína: Uma Abordagem Prática

Código	15889
Ano	1
Semestre	S2
Créditos ECTS	5
Carga Horária	PL(40H)/S(5H)/TP(5H)
Área Científica	Ciências da Saúde
Objectivos de Aprendizagem	O curso avançado "Do gene à proteína: uma abordagem prática" vai permitir aos alunos aplicarem no futuro estes conhecimentos na realização de tarefas relacionadas com o projeto de doutoramento. No final da UC o estudante deverá ser capaz de: a) Identificar os diferentes pontos de controlo da expressão génica e caracterizar os mecanismos moleculares envolvidos e sua regulação; b) Descrever os princípios básicos subjacentes a técnicas de análise da expressão génica por PCR em tempo real e Western blot e compreender a sua utilização em diferentes contextos experimentais; c) Executar os procedimentos laboratoriais das técnicas de PCR em tempo real e Western blot; d) Analisar e interpretar resultados que resultam de experiências de análise da expressão génica; e) Elaborar um plano experimental associado a uma das técnicas de análise da expressão génica; f) Desenvolver a capacidade crítica e de análise de resultados científicos, e a interação com os colegas e professores de forma colaborati
Conteúdos programáticos	Os conteúdos abaixo serão aplicados na realização de um mini-projeto prático que visa avaliar o efeito do silenciamento de um gene numa linha celular na expressão de um gene associado à proliferação celular. 1. Regulação da expressão génica: promotores, enhancers/silencers, insulators, mediadores, co-reguladores, mecanismos de splicing alternativo, RNA de interferência, miRNAs, lncRNAs, remodelação da cromatina, e metilação de ilhas CpG. 2. Ferramentas avançadas na edição da expressão génica: siRNAs, shRNAs, e CRISPR 3. Preparação de amostras para extração de ácidos nucleicos e proteína total. 4. PCR em tempo real: fundamentos, métodos de deteção, desenho de primers, análise da especificidade e eficiência dos primers, normalização, quantificação absoluta e relativa, análise de resultados. 5. Western blot: fundamentos, métodos de deteção, seleção de anticorpos, normalização, quantificação relativa, e análise de resultados.
Metodologias de Ensino e Critérios de Avaliação	As metodologias de ensino estão centradas no aluno e visam incutir uma aprendizagem ativa através da autoaprendizagem orientada, e pela discussão/interação com os colegas durante as aulas teórico-práticas (TP) e laboratoriais (PL). A aprendizagem é desenvolvida em seminários temáticos, complementados e discutidos durante as aulas TP e PL. São fornecidos os recursos apropriados para a aquisição dos objetivos deste curso avançado. A avaliação vai permitir avaliar corretamente tanto os conhecimentos como as competências técnicas adquiridas nas diversas atividades. Os objetivos a) e b) são avaliados através de um teste teórico. O objetivo c) é avaliado através da observação da execução das técnicas laboratoriais. O objetivo d) é avaliado no teste teórico e através da apresentação e discussão de artigos. O objetivo e) é avaliado através do delineamento de uma experiência prática. O objetivo f) é avaliado ao longo das atividades realizadas pela interação com os colegas.
Bibliografia principal	Livro: - Molecular Cell Biology, Lodish et al., 9th edition, New York : Macmillan Learning, 2021. Artigos: - DOI: 10.3390/ijms17030291 - DOI: 10.1093/nar/29.9.e45 - DOI: 10.1016/j.ab.2020.113608 - DOI: 10.1002/bmb.21516 - DOI: 10.1007/s10529-006-9127-2 - DOI: 10.3390/cells9071675 - DOI: 10.1016/j.bdq.2015.01.005 - DOI: 10.1186/1471-2199-11-74 - DOI: 10.2144/btn-2019-0065 - DOI: 10.2144/05391RV01 - DOI: 10.1007/s13353-013-0173-x - DOI: 10.1038/nprot.2006.83
Língua	Português

Regente


	Cláudio Jorge Maia Baptista

Curso

Do Gene à Proteína: Uma Abordagem Prática

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