| Código |
8435
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| Ano |
1
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| Semestre |
S1
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| Créditos ECTS |
6
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| Carga Horária |
TP(60H)
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| Área Científica |
Bioquímica
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Tipo de ensino |
Presencial.
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Estágios |
Não aplicável.
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Objectivos de Aprendizagem |
Esta unidade curricular dá aos estudantes uma perspetiva geral da Biologia Molecular e suas aplicações, com uma forte componente prática, de modo a adquirirem competências ao nível da investigação científica, do diagnóstico molecular e das ciências forenses.
No fim desta Unidade curricular os estudantes devem ser capazes de:
1- Descrever as bases químicas e biológicas subjacentes às técnicas de Biologia Molecular demonstrando saber aplicá-las adequadamente;
2-Descrever as técnicas de isolamento e manipulação de ácidos nucleicos;
3-Descrever as metodologias de análise de expressão génica e suas aplicações;
4-Executar as principais técnicas de biologia molecular: isolamento de DNA, PCR, eletroforese em gel de agarose, restrição e clonagem.
5-Demonstrar e integrar os conhecimentos avançados na área da Biologia Molecular e aplicá-los às ciências forenses e ao diagnóstico molecular, sabendo planear experiências com espirito crítico.
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Conteúdos programáticos |
TEORIA 1.Biologia Molecular: história 2.As moléculas da Biologia Molecular: ácidos nucleicos e proteínas -Estrutura -Genomas procariota e eucariota 3. Isolamento de DNA e de RNA 4.Manipulação de ácidos nucleicos -Eletroforese -PCR -Nucleases e enzimas de modificação -Vetores de clonagem e moléculas recombinantes -Sequenciação de DNA -Identificação/clonagem de genes a partir de bancos de DNA 5.Análise da expressão de genes e de proteínas -RT-PCR e PCR em tempo real -Hibridação, blotting e Hibridação in situ -Hibridações subtrativas e “microarrays” de DNA -Next Generation RNASequencing (RNAseq) -Transfeção com um gene repórter -Western blot e imunocitoquímica 6. Aplicações da Biologia Molecular -Marcadores genéticos, fingerprint de DNA e ciências forenses -Análise de ácidos nucleicos e diagnóstico molecular - Pequenos RNAs (sRNA) e melhoramento de plantas -Organismos transgénicos -Edição do genoma: a tecnologia CRISPR-Cas. PRÁTICA 1.Isolamento de RNA total a partir de córtex cerebral de rato. 2.Síntese de cDNA. 3.PCR e eletroforese -Clonagem em pNZY28A.4.Transformação de E.coli. 5.Preparação de DNAp. 6.Restrição do DNAp e análise. 7.Análise da sequenciação do clone. 8.Bioinformática:-Bancos de dados genéticos;-identificação de sequencias (NCBI); -anotação de genomas; comparação de sequências (dados do Genbank); -comparação de sequências no BLAST;-pesquisa de mutações e de locais de corte para enzimas de restrição;-Desenho de "primers".9.Resolução de problemas sobre a teoria.
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Metodologias de Ensino e Critérios de Avaliação |
-Componente Teórica (CT, 80%):
Corresponde à media dos dois testes escritos (exclusão: média <6 valores)
-Componente Prática (CP, 20%): Correspondente ao desempenho laboratorial e a um relatório escrito sobre o trabalho desenvolvido nas aulas laboratoriais(50% de cada)
-Nota de frequência = 0,8xCT+0,2xCP
-Classificação Mínima Ensino-Aprendizagem: 6 valores
Assiduidade: 70%teóricas, 90%práticas
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Bibliografia principal |
1.Bibliografia principal
- Lodish H, Berk A, Zipursky SL, et al. “Molecular Cell Biology”. 4th or 5th Ed. New York: W. H. Freeman, 2000 or 2004(http://bcs.whfreeman.com/lodish5e/)
-Alberts B., Bray D., Hopkin K. et al, “Fundamentos de Biologia Celular”. 3th Ed. Artmed, 2011.
2.Bibliografia complementar
- C. Arraiano e A. Fialho, “O mundo do RNA”, 1ªEd, Lidel, 2007
- Carlos Azevedo,“Biologia Celular e Molecular”, , 4ªEd, Lidel, 2005
-“Cell Biology”,3th Ed ; A Laboratory Handbook ; Edited by: Julio E. Celis, Copyright, Elsevier Inc., 2006
- PubMed: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/
-Blast: http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi
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| Língua |
Português
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